Informații despre pregătirea soluțiilor de aur coloidale pentru testul antigenului

Pregătirea unei soluții de aur coloidale pentru testul antigen adoptă metoda de reducere a citratului de trisodiu pentru a pregăti o soluție de aur coloidală. Luați 1000 ml de apă ultrapură și încălziți -l la fierbere pe un agitator magnetic, adăugați 40 ml soluție de acid cloroauric, când soluția fierbe din nou, adăugați rapid 36 ml soluție de citrat de trisodiu 1%, continuați să fierbeți atunci când culoarea soluției transformă purpuriu de 5 min, opriți încălzirea și să vă restaurați la volumul inițial cu apă ultrapure după răcire. Diametrul mediu și potențialul zeta al particulelor de aur coloidal au fost măsurate cu un analizor de mărime a nanoparticulelor și păstrate la temperatura camerei la întuneric. Deci, care sunt informațiile despre pregătirea soluțiilor de aur coloidale pentru testul antigenului? Să aruncăm o privire.

Iată lista de conținut:

l Pregătirea conjugatelor etichetate din aur coloidal

l Pregătirea benzilor rapide de testare a antigenului

L Limita minimă de detectare

l Test de stabilitate

Pregătirea conjugatelor etichetate de aur coloidal

Luați 100 ml test de antigen aur coloidal în două pahare curate, respectiv, în funcție de condițiile de pH marcate optimizate, adăugați 3,3 ml și 2,1 ml de 0,1 mol/L carbonat de potasiu pentru a ajusta pH-ul, amestecați cu un agitator magnetic la 300 r/min timp de 10 minute, iar adăugarea de șoarece anti-N monoclonale și 15 minute; S -au adăugat 2 ml de soluție de 10% BSA și s -au adăugat 2 ml soluție de 10% BSA, iar agitare a fost continuată timp de 20 de minute; După agitare, soluția de aur coloidală a testului antigen a fost transferată în două tuburi de centrifugă de 50 ml, stabilite parametrii centrifugei au fost de 9000 r/min, 20 min și 4 ° C și s -a efectuat centrifugare. După centrifugare, scoateți cu atenție tubul de centrifugă, nu vă agitați, îndepărtați supernatantul cu o pipetă, colectați precipitatul, reconstituiți -l cu diluant conjugat la 10 ml și depozitați la 4 ° C la întuneric. Diametrul mediu și potențialul zeta al particulelor conjugate de aur coloidal de testare antigen au fost măsurate printr -un analizor de mărime a nanoparticulelor.

Pregătirea benzilor rapide de testare a antigenului

Gata de probă a fost acoperită uniform cu soluția de tratare a plăcuței de probă, iar cantitatea de acoperire a fiecărei fibre de sticlă a fost de 30 ml și s -a uscat la 50 ° C timp de 24 de ore. Diluați testul rapid antigen, anti-N, anti-N, anticorp monoclonal al proteinei anti-N și anti-aur coloidal, marcat de aur, proteină DNP-BSA conjugată cu diluant conjugat, raportul de volum este de 18% și, respectiv, 20%, iar tratarea cu suma de aur diluată de aur a fost de 30ml, iar a fost acoperit cu lichid, s-a dat jos, suma de co-aur a fiecărui fibra de sticlă a fost 30ml 45 ° C pentru 24 ore. Anticorpul monoclonal anti-N anti-N și anticorpul policlonal anti-DNP de iepure au fost diluate cu PBS conținând 0,01mol/L pH7,4 și 5% trehaloză la concentrația de 2,0 mg/ml și, respectiv, 1,0 mg/ml. Ca linia de detecție (linia T) și linia de control al calității (CLINE), anticorpul de captare a fost acoperit pe o membrană nitroceluloză (membrană NC) și uscată la 45 ° C pentru 48H. Filmul NC pregătit, tamponul conjugat, pad-ul de probă și tamponul absorbant de apă au fost lipite pe placa de jos din PVC, tăiate în 3 mm/dungi cu un slitter, introduse într-o carcasă și ambalate într-o pungă de folie de aluminiu. În timpul testului, introduceți tamponul nazofaringian în tubul de ridicare pre-umplut cu soluția de extracție (10mmol/LPBS, ph7.4, 1%NP-40) și adăugați 3 picături (100µl) în jos în pic în gaura de probă a cărții de testare după extracție timp de 15s. 15 min Timp de reacție pentru interpretare vizuală. Linia T de testare a antigenului și Cline sunt ambele pozitive, linia T nu este colorată, clina este negativă, clina nu este colorată, ceea ce indică faptul că banda de testare este eficientă și trebuie să fie re-testată.

Limita minimă de detectare

Studiile de limită minimă de detectare au fost efectuate cu culturi de virus ucis căldură. Eluatul din tampoane nazofaringiene de la oameni sănătoși a fost utilizat ca matrice negativă pentru testul antigenului. În primul rând, a fost efectuată o diluare de 10 ori a gradientului. După rezultatul negativ al testului de antigen rapid, concentrația anterioară a fost apoi diluție de 2 ori a gradientului și nu mai puțin de 19 ori din 20 de teste au fost pozitive. Nivelul de concentrație (≥95%) a fost utilizat ca limită minimă de detectare a reactivului.

Test de stabilitate

Puneți cardul de reactiv finit de test antigen pregătit într -un cuptor de 50 ° C și testați cu substanțe de control al calității concentrației ridicate și scăzute la fiecare două săptămâni. Repetați testul de 3 ori pentru fiecare eșantion. Diferența în adâncimea benzii între reactivul de distrugere accelerat de temperatură ridicată și reactivul de control timp de 1 săptămână și 8 săptămâni.

Cele de mai sus sunt informațiile relevante despre prepararea soluției de aur coloidal pentru testul de antigen. Dacă sunteți interesat de testul antigen Rapid-19 , SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test, ne puteți contacta. Site -ul nostru este www.bioteke.cn.