Vizualizări:31 Autor:Editor de site-uri Timpul publicarii: 2022-12-05 Origine:teren
Extracția ADN -ului, ARN și proteinelor este o metodă fundamentală utilizată în biologia moleculară. Aceste biomolecule pot fi izolate de orice material biologic pentru procesarea ulterioară în aval, scopuri analitice sau pregătitoare. În trecut, procesul de extracție și purificare a acidului nucleic a fost complicat, consumator de timp, laborios și debitul general a fost limitat. În prezent, există multe metode specializate disponibile pentru extragerea biomoleculelor pure, cum ar fi protocoalele bazate pe soluții și bazate pe coloane. Metodele manuale au parcurs un drum lung în timp, iar diverse produse comerciale includ kituri complete care conțin majoritatea componentelor necesare pentru a izola acizii nucleici, dar cele mai multe dintre acestea necesită etape de centrifugare repetate urmate de eliminarea tipului de eșantion a supernatantului și procesare mecanică suplimentară. În ultimii ani, a existat o cerere din ce în ce mai mare de sisteme de automatizare concepute pentru laboratoare medii și mari. Este o alternativă la metodele manuale cu intensitate de muncă.
Care este principala diferență între extracția ADN -ului și extracția ARN în extractorul de ADN/ARN?
Care sunt pașii specifici pentru extracția ADN -ului și extragerea ARN -ului?
Care este extractorul ADN/ARN funcțional?
Principala diferență între ADN și extracția ARN este nivelul pH -ului. Un pH de 8 este necesar pentru extragerea ADN -ului și este necesar un pH de 4,7 pentru extragerea ARN. ADN -ul tinde să se denatureze și să intre într -o fază organică la pH acid. Hidroliza alcalină a ARN -ului într -un mediu alcalin are loc din cauza celor 2 'OH în ribose. De asemenea, există o altă diferență importantă. Procesul de extracție ARN purifică ARN, în timp ce procesul de extracție ADN purifică ADN -ul. Procesul de extracție al ADN -ului se desfășoară prin aceste etape - catabolismul proteinelor și lipidelor membranei, liza celulară, agregarea cataboliților în soluție salină concentrată și precipitarea ADN -ului în prezența etanolului. Acest proces în 3 etape poate include doi pași opționali
Procesul de purificare ARN constă din 4 etape distincte - liza celulelor, denaturarea proteinelor, izolarea ARN prin adăugarea cloroformului și fenolului și spălarea peletei cu etanol. Extracția ARN este purificarea ARN din probele biologice. Datorită prezenței ribonucleazei în țesuturi și celule, procesul devine complicat. Utilizarea ribonucleazei poate degrada rapid ARN -ul. Metoda utilizată frecvent în extracția ARN este extragerea tiocianatului-fenol-cloroform. Pe baza principiului centrifugarea și separarea fazelor
Extracția ADN -ului care implică separarea și purificarea ADN -ului este un proces chimic și fizic. Probele de ADN pot fi obținute din blocuri de țesut de parafină, sânge, probe de țesut (înghețate) și apare în următoarele etape - liza celulelor, izolarea ADN -ului și precipitațiile odată ce celulele sunt lizate, soluțiile de sare concentrate promovează agregarea moleculelor catabolice. Soluția este apoi centrifugată pentru a separa ADN -ul de resturile de resturi ADN diferențiat este combinat cu săruri și reactivi folosiți în ciclul celular și precipitațiile de etanol pot fi utilizate pentru purificarea ulterioară.
Funcția unui extractor de ADN/ARN este de a izola și purifica ADN -ul acizilor nucleici și ARN dintr -o probă. Acest lucru se poate face folosind o varietate de metode, dar cea mai frecventă este utilizarea enzimelor pentru a descompune proteinele și alte componente celulare care pot fi prezente în eșantion. Odată ce acizii nucleici sunt izolați, ei pot fi folosiți pentru o varietate de scopuri, cum ar fi secvențiere sau PCR.
Până în 2022, Bioteke are 51 de brevete autorizate și 12 drepturi de autor software. A trecut certificarea sistemului de gestionare a calității ISO13485.