Introducere în mașinile PCR

Mașina PCR , cunoscută și sub denumirea de instrument de amplificare a genei PCR, instrument de amplificare a PCR, instrument de amplificare a acidului nucleic de reacție în lanț a polimerazei, este un instrument care amplifică ADN -ul specific folosind tehnologia PCR (reacție în lanț a polimerazei). Mașina PCR este utilizată pe scară largă în laboratoarele medicale și biologice, cum ar fi pentru a determina dacă un corp de testare va prezenta mașini PCR sunt utilizate pe scară largă în laboratoarele medicale și biologice, de exemplu, pentru a determina dacă un organism de testare prezintă un profil de boală genetică, pentru a diagnostica boli infecțioase, pentru a reproduce genele și pentru a identifica părinții. Ce este o mașină PCR?

Iată lista de conținut:

l Structura de bază a unei mașini PCR

l Principiul de lucru al mașinii PCR

l cinetică de reacție a mașinilor PCR

Structura de bază a unei mașini PCR

O mașină PCR constă de obicei dintr -o parte de acoperire fierbinte, o parte a ciclului termic, o parte de transmisie, o parte de control și o parte de alimentare cu energie electrică etc.

Principiul de lucru al mașinii PCR

Principiul de lucru al mașinii PCR este similar cu procesul de replicare naturală a ADN-ului, a cărui specificitate depinde de primerii oligonucleotide complementare a ambelor capete ale secvenței țintă și constă din trei etape de reacție de bază: denaturare-analiere-extensie.

1. Denaturarea ADN -ului șablonului

ADN-ul șablonului este încălzit până la aproximativ 93 ° C pentru un anumit timp pentru a disocia ADN-ul șablonului dublu sau a ADN-ului dublu format dintr-o mașină PCR pentru a-l face cu un singur catena, astfel încât să se poată lega de primer în pregătirea următoarei runde de reacție.

2. Recuperarea (denaturarea) ADN -ului și primerilor șablonului

După ce ADN-ul șablonului este denaturat într-un singur strat de încălzire, temperatura este scăzută la aproximativ 55 ° C, iar primerii sunt asociați și legați de secvența complementară cu un singur catenar a ADN-ului șablonului.

3. Extensia primerilor

Conjugatul șablon-primar de ADN este sintetizat sub acțiunea TaqDNA polimerază, folosind DNTP ca material de reacție și secvența țintă ca șablon, pentru a sintetiza o nouă catenă replicată semi-conservată, complementară, cu șablonul ADN-ului, conform principiului replicării de bază și a replicării semi-consilier.

Prin repetarea procesului de denaturare-strat de extensie, se pot obține mai multe lanțuri replicate semi-conservate ', iar aceste lanțuri noi pot fi utilizate ca șabloane pentru următorul ciclu.

Mașina PCR durează 2 ~ 4 minute pentru a finaliza fiecare ciclu, și așa mai mult, în mod repetat, ADN-ul produs în fiecare ciclu poate deveni șablonul pentru următorul ciclu și fiecare ciclu amplifică numărul de copie a regiunii specifice ADN-ului între doi primer sintetici de 1 ori, iar produsul PCR Machine se amplifică rapid, în formă de PCR, de 2. 109 de ori după 25 ~ 30 runde (2 ~ 3 ore), iar în practică, în general, poate ajunge la 106 ~ 107 ori.

Cinetica de reacție a mașinii PCR

Cele trei etape de reacție ale mașinii PCR sunt repetate, ceea ce duce la o creștere exponențială a cantității de amplificare a ADN -ului. Amplificarea finală a ADN -ului reacției poate fi calculată folosind y = (1+x) n. Y reprezintă numărul de copii ale fragmentului de ADN amplificat, x reprezintă eficiența medie a amplificării pe amplificare, iar n reprezintă numărul de cicluri. Valoarea teoretică a eficienței medii de amplificare este de 100%, dar în stadiul incipient al reacției reale, creșterea fragmentului de ADN a secvenței țintă este exponențială, iar odată cu acumularea treptată de produse de mașină PCR, fragmentul de ADN amplificat nu mai crește exponențial, dar intră în perioada de creștere liniară sau perioada staționar, adică, „eficiența medie a eficienței medii a eficienței medii a mașinii PCR, adică eficiența medie a eficienței medie a mașinii PCR, a eficienței medii” Mașina PCR nu atinge valoarea teoretică.

Bioteke Corporation, care se concentrează pe diagnosticul molecular și detectarea rapidă, în special, pe extracția acidului nucleic, este un producător profesionist de înaltă tehnologie și mașini PCR. Este stabilit în orașul Wuxi, provincia Jiangsu, China. Deci, așteptăm cu nerăbdare să cooperăm cu tine.